细胞是生物体基本的结构和功能单位，体外细胞培养则是生物学、医学和药物研发等多个研究领域的基本环节。为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性和可重复性，建立稳定一致的培养环境至关重要。

  细胞培养简单吗？
  其实做好细胞培养并不简单！
  在细胞培养实验中，您可能会遇到各种各样的问题，比如培养基浑浊、沉淀、变色、细胞活力差、产物降解等，现在就和上海恒远小编一起来找原因、想对策吧。

今天，小编将和大家讨论的问题是“培养基浑浊”
   无细胞培养基的混浊通常是由于污染、光散射颗粒和聚集体、部分变性或溶解不良的补充剂（如血清或提取物）或者几种因素共同引起的结果。浑浊的主要原因是不溶性无机盐和疏水有机分子，如脂质和肽。值得注意的是过滤浑浊培养基会导致聚集组分的流失，而这些组分的流失对培养基性能的影响还未可知。浑浊也可能是死亡细胞或变性细胞衍生产物的脂质膜和细胞碎片。

以下问题解决方案主要是针对组分和补充剂造成的浑浊：
可能原因-细胞产品
1.若细胞产生等电点在6.5至8.5范围内的产物，则可能会聚集并导致培养基变浑浊。
解决方案：确定细胞产物的等电点，确保产品不会在生理pH范围内聚集。

2.谷氨酰胺重复序列大于10的蛋白质具有聚集趋势。
解决方案：确定细胞产生的异源蛋白是否含有自我聚集的模序。

可能原因-提取物：
富含脂质物质的提取物，如脑提取物，可造成培养基混浊。
解决方案：在使用时再添加提取物，或者使用提取物的替代品；去除提取物中的聚集物质并确定其是否仍有效用。

可能原因：脂肪酸
调配不当的脂肪酸可以自我结合。

解决方案：
1.细胞存在时加入α生育酚。
2.添加细胞后再加脂肪酸作为补充剂。
3.脂肪酸与环糊精或脂质体复合添加。
4.尽量添加含脂肪酸的血清。
5.尽量添加与白蛋白关联的游离脂肪酸
6.尽量添加白蛋白硫辛酸。

可能原因：蛋白质水解产物
蛋白水解产物含有不同疏水性和等电点的肽。当添加到指定pH的培养基中时，某些组分形成聚集体。
解决方案：
1.消除或降低蛋白质水解产物的浓度。
2.尝试不会造成培养基浑浊的其他蛋白质水解物。

可能原因-蛋白质和肽：
蛋白质及多肽在添加到培养基中时可能是可溶的，但当氧化应激或还原剂改变其二级结构并改变其等电点或暴露疏水区域时，蛋白质和多肽会变得不溶或聚集。
解决方案：避免在培养基中产生氧化应激的条件。

可能原因-血清
凝血过程完成前冷冻的血清在解冻后加入培养基，随着过程的继续，血清可能变得混浊。
解决方案：解冻后不要过滤血清，让凝血过程完成。

可能原因-巯基
金属离子，氧化组分和含巯基分子之间的相互作用可能产生聚集物质使培养基变浑浊。
解决方案：避免在培养基中产生氧化应激的条件。