研究背景：
    非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的*极端形式，其特征为脂肪肝、小叶炎症和进行性细胞周期性纤维化。肝星状细胞（HSC）是响应非酒精性纤维化脂肪性肝炎发展进程中的主要细胞类型。非酒精性纤维化脂肪性肝炎的发病机制非常复杂，有效的治疗方法很少，目前对肝纤维化的机制了解甚少。然而，越来越多的研究表明microRNAs（miRNAs）参与肝纤维化进程的不同阶段，包括HSC的激活、增殖和细胞外基质（ECM）的产生和沉积。*近的研究表明，miRNAs可以调控HSC的活化、增殖和凋亡，从而对肝纤维化进程产生影响。

材料与方法：
   本研究利用miRNA芯片技术对营养性纤维化脂肪性肝炎小鼠的miRNA谱进行了研究，对可能参与肝纤维化的发病机制相关的miRNAs进行了研究，以期为治疗NAFLD提供新的药物靶点。
   取材：以甲硫氨酸胆碱缺乏（MCD）饮食喂养至八周龄的雄性C57BL/6J小鼠。驯化1周后，将小鼠分成两组（每组n=6）。对照组小鼠饲喂添加重酒石酸胆碱-DL甲硫氨酸的饮食，非酒精性脂肪性肝炎组小鼠饲喂MCD饮食。8周后，小鼠在禁食12小时后死亡。取部分肝脏固定在10％福尔马林中用于组织学分析，另取部分肝脏组织于液氮中快速冷冻，-80℃冰箱中储存备用。

研究发现：
   本研究在甲硫氨酸胆碱缺乏饮食诱导纤维化的NAFLD小鼠模型的肝脏中观察到miR-130A-3p的表达显著减少，并且发现在激活的肝星状细胞（HSC）中miR-130A-3p的表达也显著减少。双荧光素酶活性测定证实转化生长因子β受体（TGFBR）1和2都是miR-130a-3p的靶基因，并且TGFBR1和TGFBR2在肝脏中表达量显着增加。
   在HSCs中过表达miR-130A-3p抑制了HSC的活化和增殖，并伴随TGFBR1、TGFBR2、Smad2、Smad3、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9、I型胶原蛋白（Col-1）和Col-4的表达减少。
   miR-130a-3p的过表达通过诱导caspase依赖性凋亡基因的表达来促进HSC凋亡。si-TGFBR1和si-TGFBR2转染实验结果显示其对HSC功能的影响与miR-130a-3p一致。TGFBR1和TGFBR2减缓了由miR-130a-3p介导的Smad2、Smad3、Col-1和Col-4的mRNA及蛋白质表达水平的降低。
    本研究结果表明miR-130a-3p在非酒精性纤维化脂肪性肝炎进程中可能通过TGF-β/SMAD信号通路直接靶向TGFBR1和TGFBR2起到负调节HSC活化和增殖的关键作用。

 

 

 

图miR-130a-3p抑制细胞增殖和生长并诱导活化的HSC凋亡