抗体滴定（antibody titration）就是确定合适的抗体用量和抗体浓度，以实现阳性信号尽可能强，而阴性信号尽可能低即得到合适的S/N（信噪比值）。一般抗体供应商都会推荐抗体使用量， 如Test包装抗体。但为了达到很棒的实验效果及节省抗体，我们则需要自己做滴定，尤其在多指标流式检测实验中，抗体滴定就更加重要了。
具体的抗体滴定步骤如下：
以APC-CD49b（BioLegend Cat#108909）抗体为例，浓度为0.2mg/ml，推荐抗体使用浓度为 ≤0.25 μg/100ul 。起始滴定浓度一般为推荐浓度的两倍（即起始浓度为0.5ug/100ul），做8次2倍稀释。假设用100ul体积，在首孔/管的97.5ul稀释液里加入2.5ul抗体，然后从首孔/管取出50ul加入第二孔/管的50ul稀释液中，从第二孔/管中取出50ul加入至第三孔/管的50ul稀释液，依次倍比稀释，最后，向每个孔中加入50ul细胞，注意整个操作，抗体要充分混匀。
抗体滴定并不是以抗体量/细胞数来表示的，滴定的是抗体浓度（如ug/ml），其与细胞量在标记10万和1000万个细胞范围内相关性不大。如果您准备用于标记1亿个细胞，千万不要将抗体用量也增加100倍。通常只需增加2－5倍即可，有时甚至不用增加用量。如果您经常标记1亿个细胞（如分选细胞时），做2－3个点的快速滴定是很有用的。同样的道理，如果您只标记5万个细胞，那么也千万不要减少抗体用量。记住，与抗体用量相关的指标是浓度（抗体量/染色体积）。这意味着，如果您是100ul的体积下进行滴定抗体，而染色时使用1ml的体积，那么你就需要用10倍的抗体量。同样的道理，如果您在200ul体积下进行滴定，而染色时使用50ul体积，那么您就需要用1/4的抗体量。
染色之后，一般确定SI（染色指数）或S/N（信噪比）z高的浓度，但有时也需要考虑一下抗体用量。
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