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BIM解析:酶联免疫试剂盒配对抗体的方法详解

点击次数:916次     发布时间:2016/10/10 9:35:56



                                                                       BIM解析:酶联免疫试剂盒配对抗体的方法详解

酶联免疫试剂盒单克隆抗体制备时很多朋友会遇到这样的问题,即我们免疫用的蛋白为原核表达蛋白而目的蛋白是真核蛋白或病毒等,因为没有标准品我们做出来的抗体没有办法用标准品来验证是否与其发生反应,最终导致我们做出的是无用抗体。以下内容为我公司实验室技术总结的几种方法供大家参考,希望对大家有所帮助。
一、若要检测的抗原为某种新的病毒
ELISA试剂盒方法:1、大量做出该病毒某个蛋白的单克隆抗体;    
2、大量采集该病毒疑似感染动物或人血液,用PCR的方法进一步确定每份血液是否真的有该病毒存在;  
3、将你做出的大量抗体中的一个做标记作为标记抗体,其他所有抗体作为包被抗体,检测第二步中确定阳性的血清,结果与阴性血清做对比,并画出点状分布图。若阳性血清大部分的点在阴性血清之上恭喜你找到配对抗体了;若结果相差不大,请重新标记一株抗体做相同实验。
二、若要检测抗原为某一细胞因子
ELISA试剂盒方法:1、通过超表达的方法建立稳定表达的细胞系,注意要在目的蛋白上加相应的标签,以便纯化。若仅仅是找到配对抗体则不需要纯化甚至不需要建立稳定表达的细胞系瞬时转染就可实现,若要进一步作出标准曲线请纯化。
2、 将细胞系建立后,我们就可以拿到标准品了,做配对工作就相应简单。
3、若该种细胞因子可有某种阳性刺激物大量刺激而来,也可不做细胞系。用阳性刺激物刺激,我们细胞刺激物的上清液来做标准品也可以
服务简介
一站式的抗体服务:抗体配对-Elisa试剂盒/胶体金试纸-抗体应用专利。完整产业链开发能力-高附加值,具有丰富的Elisa及胶体金试纸条开发经验和高附加值抗体(IHC、FACS、IP、CHIP)开发能力,全面完整的验证体系。

主要流程

 
 
项目论证
 
项目方案设计
 
免疫原制备
 
免疫小鼠(兔)
 
细胞融合及筛选(≥50株阳性细胞株)
 
抗体生产(≥50个)
 
配对筛选样品验证
 
Elisa(胶体金)配对筛选和调试

订购信息

项目名称 验证标准 服务周期
P1(ELISA pair) 对免疫原Elisa配对检测结果呈阳性 对非免疫原物质呈阴性 4-6月
P2(LF pair) 对免疫原LF配对检测结果呈阳性 对非免疫原物质呈阴性 4-6月
K1(ELISA kit) Elisa抗体配对筛选 试剂盒体系调试优化 试剂盒评估及稳定性实验 5-8月
K2(LF kit) LF抗体配对筛选 试剂盒体系调试优化 试剂盒评估及稳定性实验 5-8月

客户提供

 

提供样品

抗原,抗体,后期提供样本检测

提供信息

抗原信息表

最终交付

 

交付成品

抗体配对交付标准,a. 配对成功的抗体2mg或血清2-3m;b. 配对成功的细胞株。ELISA/Lateral-Flow试剂盒(试纸条)开发交付标准,a. 配对成功的抗体2mg或血清2-3ml;b. 配对的细胞株;c. 一定数量的试剂盒(试纸条)成品

交付报告

完整的实验报告; 配对信息; 试剂盒试纸条生产的工艺流程(不包括配方)

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TEL:18221656311  点击拨打热线

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