ELISA
操作常见问题解决办法
ELISA
方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但
ELISA
测定中影响因素较多,而且
其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引
起
ELISA
测定错误结果的原因主要有:
①
标本因素;
②
试剂因素;
③
操作因素。下面就一些
常见
ELISA
操作过程中的问题一一分析。
ELISA操作常见问题“加样”的解决办法
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。下面就Elisa试剂盒中“加样”操作过程中的问题为您具体分析。
步骤 | 可能原因 | 解决办法 |
选 材 | 选择质量优良的检测试剂(可以看下ELISA试剂盒选购经验总结篇),操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。 | |
加 样
| 1.血清或血浆标本分离不好即进行加样; 2.手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3.加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
| 1.标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2.加样后及时放入孵箱。 3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4.如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
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5.标本较多时,请分批操作。 |