小鼠ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体。
②酶标记的抗原或抗体。
③酶作用的底物。
根据小鼠ELISA试剂盒的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法。
（二）双位点一步法。
（三）间接法测抗体。
（四）竞争法。
（五）捕获法测IgM抗体。
（六）应用亲和素和生物素。
小鼠ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 从而使溶液显色.
小鼠ELISA试剂盒检测试剂厂家较多；不同厂家出产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别，使用质劣的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。因此，选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。
操作技术的影响
吸量不准确，直接影响检测结果。因此加样器也要经常清洗，定期校准。
温育影响
抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求，酶标板周围与内部孔升降温速率不同，造成周边与内部孔结果差异；干浴与水浴存在明显的差异，尽可能使用水浴，并要求固相板放入水中，减少受热不均，贴密封膜，防止污物浸入。
加样次序影响
有时我们在加样过程中，常常会遇到个别标本未离心等情况，为了节约时间，往往这时我们会先加酶结合物，然后等标本分离好后再加标本，这样，竟常常会造成HBeAb和HBcAb的假阴性。因为HBeAb和HBcAb都是竞争抑制法，先加入酶标记的抗体，首先与固相载体上的抗原结合，待加入显色剂后，因酶的存在而显色，故呈阴性。
综上所述，对临床检验小鼠ELISA试剂盒测定中出现的假阳性或假阴性结果，要从多方面进行分析除试剂因素和操作因素之外，更多的应从标本因素方面进行分析，并采取相应措施排除干扰作用。