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本章解诉:酶联免疫试剂盒的实验建议

点击次数:1173次     发布时间:2015/8/3 11:27:07

对酶联免疫试剂盒的见解有不对的地方,希望指正或者直接拍砖。如何灵活应用酶联免疫试剂盒这个检测方法以及如何去挑选ELISA试剂盒。酶联免疫试剂盒这个方法的原理,大家都很清楚,网上的资料一大堆。可真正用起来的时候,有时候就有点犯糊涂,我谈一下自己的理解。

酶联免疫试剂盒实验原理:用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。我们在操作中应该注意以下几点:
1. 酶联免疫试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,酶联免疫试剂盒并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,酶联免疫试剂盒洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
做到以上几点,就不在为酶联免疫试剂盒的实验而担心了,酶联免疫第三方检测中心提供完善的技术指导,如有任何Elisa技术问题均可来电咨询。我们承诺为您提供全方位的服务。

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