上周青岛农业大学徐老师在我公司购买了相应的抗体自己包被Elisa试剂盒。由于范老师是位实验新手，刚刚接触Elisa实验，研究大鼠干扰素相关指标的实验，做完大鼠γ干扰素Elisa实验后反应标准曲线的梯度都不好。刚加完显色剂的时候梯度还算明显，但是显色比较浅，随着时间延长(大概6、7分钟)以后梯度就不明显了。终止反应后测得的值梯度就没有了。

        为此，我公司技术员对Elisa标准曲线做不好的原因做出分析：

        1.刚加完显色剂时梯度明显：显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。

        2.酶浓度太高，导致最后显色结果都是高的

        3.包被-酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强，或者酶标仪读数范围不够。

        4.样本中有能够催化底物的物质，没洗下来。

        5.建议：包被、酶标重新做梯度，先用较低的浓度把梯度摸索好，然后再优化灵敏度，最后调出所需的灵敏度、线性范围

        6.有条件的话，可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上，加完底物三分钟读数。

        7.蛋白系统灵敏度够的话，显色十分钟就差不多了。

        8.酶是自己标的这种情况的，HRP比例不要太高。

        问题解决后，徐老师对我公司试剂盒的售后服务非常满意，并表示下学期会有新的实验课题，直接买我公司的进口品牌Elisa试剂盒。非常感谢青岛农业大学徐老师对酶联免疫学第三方检测中心的支持与信赖。