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考马斯亮蓝染色液使用说明

点击次数:3257次     发布时间:2015/7/10 11:35:56

 
Storeat 2-8℃for12months
ForResearchUseOnly
 
一、试剂盒说明
考马斯亮蓝蛋白快速染色液(CoomassieBrilliantBlueFastStainingReagent)是以考马斯亮蓝G250为染料,可用于
SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的快速染色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
 二、试剂盒组份
 
组      份
KGP1001
储存温度
考马斯亮蓝蛋白快速染液
250 ml
2-8℃
 
 三、操作步骤
 
1.凝胶洗涤:电泳结束后,取胶放入约50-100ml蒸馏水中,在摇床上摇动5分钟,倒弃液体,再重复两次,共 洗涤三次。本步骤的目的是为了去除凝胶中的SDS等干扰物质。SDS的残留会影响染色效果,如果胶比较厚,可增加洗涤次数和时间。
2.蛋白染色:弃蒸馏水,加入适当体积的考马斯亮蓝快速染色液,使染色液能盖住凝胶,且液面至少高出三个胶的厚度为宜。根据蛋白量的多少,蛋白量大的条带10分钟左右会出现,大部分蛋白条带会在30分钟左右全部出 现,约1-2小时后几乎所有的蛋白染色带会到达峰值。
3.凝胶洗涤:染色至看到清晰的目标蛋白条带后即可停止染色。弃染色液,加入适量的蒸馏水洗涤凝胶 2次,每 次1分钟。
4.脱色:加入适量的蒸馏水或去离子水脱色至背景清楚为止。然后即可拍照记录。尽管在水中至少一天内不会褪色,但建议尽快拍照记录。
5.脱色后的凝胶可继续用其他方法染色,如考马斯亮蓝常规染色,银染等。
 
 
四、注意事项
 
本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,请穿实验服并戴一次性手套操作

 

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