三糖铁琼脂培养基概述
英文名称:TSI Agar;Triple Sugar Iron Agar
其他名称:三糖铁培养基;TSI琼脂
级别:BR
成分(g/L)
蛋白胨:20.0
牛肉浸膏:5.0
乳糖:10.0
蔗糖:10.0
酚磺酞:0.025
葡萄糖:1.0
氯化钠:5.0
硫酸亚铁:0.2
硫代硫酸钠:0.2
琼脂:12.0-15.0
PH:7.2-7.6
用法:取本品64g,加1000ml蒸馏水,加热煮沸至完全溶解,115℃灭菌30分钟后制成较高直立段斜面,备用
质量控制:中国药典2005年版
性状:粉红色粉末。一种鉴别培养基。易吸湿。加水煮沸溶化后,成橘红色半透明液体
用途:生化研究。用于肠杆菌科细菌的生化试验。测定细菌有无发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖而产气和产生硫化氢的能力,初步鉴定革兰阴性杆菌。
保存:RT
沙门氏显色培养基用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中沙门氏菌的快速检测。除伤寒沙门氏菌(在培养基上显无色)不能直接鉴定外,其它沙门氏菌显亮红色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,枸橼酸杆菌显紫色,其它细菌显黄色或无色。在食品污染中,主要的沙门氏菌为非伤寒沙门氏菌外的其它沙门氏菌,本培养基的特异性非常高,可达98%,是一种很理想的快速检测培养基。
三糖铁琼脂培养基的灭菌
一般培养基可采用121℃ 高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。
某些畏热成分,如糖类,应另行配成20% 如或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应从无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50℃ 左右的培养基中。
琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出、待冷至55-60℃时,摆置成适当斜面、待其自然凝固。
培养基添加成分的制备
制备含有有毒物质的添加成分(尤其是抗生素)时应小心操作(必要时在通风橱中操作)。
按说明书操作,注意有效期。
抗生素工作溶液应现用现配。
批量配制抗生素溶液分装后冷冻储存,解冻后不能再次冷冻使用。
厂商应提供冷冻对抗生素活性影响的有关资料,也可由使用者自行测定。
培养基的质量测试
每批培养基制备好以后.应仔细检查一遍:如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。将全部培养基放入36±1℃ 恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。用有关的标准菌株接种1-2 管或瓶培养基,培养24- 48 小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。
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