一、酪蛋白胨基本概述
英文名称:Casitone
其他名称:酪胨;胰酪胨;胰酪蛋白胨
级别:BR
澄清度:2%水溶液透明,无碱性沉淀及碘酸盐沉淀。
PH值:5.5-7
总氮:>12%
氨基酸:>4%
氯化物:<1%
色氨酸:>0.8%
灰分:<13%
水分:<5%
细菌学指标
硫化氢试验:阳性
靛基质试验:阳性
V-P试验:阳性
可发酵糖试验:阴性
色素生成试验:菌落色泽纯正
营养试验:接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,37oC培养24小时,菌落直径应在1.00mm以上,95%以上为S型菌型。
灵敏度试验:32210菌株生长至10-5,7316菌株生长到10-4
性状:本品是用酪蛋白经胰酶水解精致而成,呈淡黄或类白色粉末。
用途:生化研究。广泛用于细菌培养基的制备
保存:RT
二、酪蛋白胨具体说明
O157显色培养基操作说明为例
用途:用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色
大肠杆菌O157 显色培养基用于食品、病人粪便样品中 O157 菌的快速检测。 O157 菌显紫色,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色;其它细菌显黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服 SMAC 培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份 (g/L)
特殊营养物质 50.0
混合显色剂 2.5
琼脂 15.0
pH 7.0 ± 0.1 25 ℃
CT 添加剂 1ml/ 支 *5
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 13.5g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 10-20 分钟。冷却至 45-50 ℃时,加入 CT 添加剂混匀,
倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中, 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到 O157 菌显色培养基上,做 2 个平板;
4 、 37 ℃培养 18-24h , O157:H7 菌显紫色 , 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色, 其它细菌显黄色或无色;
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡蓝色。制备好的平板呈蓝色色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃培养 18-24h 小时:
质控菌株 ATCC 生长情况 菌落颜色
大肠杆菌 O157 +++ 紫色
金黄色葡萄球菌 25923 -/+ 黄色
大肠杆菌 25922 +++ 暗蓝色
沙门氏菌 +++ 蓝色
奇异变形杆菌 +++ 无色
方法的局限性
本培养基对典型大肠杆 O157:H7 必须做血清学试验或生化试验。
典型特征
典型 O157:H7 菌显紫色 , 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色。
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